徠卡顯微鏡-顯微圖像分析系統(tǒng)的工作程序

1．標(biāo)本成像：慢慢移動標(biāo)本，使需要被觀察的部位能在顯微鏡上得到適當(dāng)放大的圖像。

2．圖像獲?。皇髽?biāo)點(diǎn)擊打開顯微圖像分析系統(tǒng)的功能，以進(jìn)行圖像采集與獲取。

3．檢測：徠卡顯微鏡在圖像分析過程中設(shè)法從圖像中確定并且分離出需要分析的指標(biāo)相。“相”是圖像中要測量的部分的總稱。在檢測過程中要使用圖像框（im，印frame）和測量框（measurementframe）。檢測只在圖像框內(nèi)進(jìn)行，框的大小按需要而定，測量框在圖像之內(nèi)，是進(jìn)行測量的部位。兩個框之間的部分稱為保險區(qū)。圖像中每個被測物部有其*的特征計算點(diǎn)（feaurecountpoint，F(xiàn)CP），F(xiàn)CP在被測物的zui低點(diǎn)，如圖1，13中上面lo個被測物的FcF均在測量框內(nèi)，可計數(shù)或作其他測量，而zui下面2個被測物的FcP不在測量框內(nèi)，則不計在內(nèi)，在測其他區(qū)域時再計算，有的被測物可能被測量框截斷，那么測量框外的那部分被測物應(yīng)該位于保險區(qū)，即保險區(qū)要大于被測物，才能觀察FcP是否在測量框內(nèi)而決定取舍。這樣當(dāng)換到相鄰的區(qū)域進(jìn)行測量時，不會使萊圖形重復(fù)測量，可避免測量誤差。圖1—14顯示放置標(biāo)本的顯微鏡鏡臺的移動方式，可由計算機(jī)控制，用編制好的程序，使鏡臺按一定方式移動，也對以人工操作。圖中可以看出每個部他都將通過測量框，不會遺漏。

4．陰影校正；徠卡顯微鏡校正圖像細(xì)節(jié)直到正確無誤并達(dá)到朗被測量的要求。所謂陰影是指肉眼看來是均勻的視場內(nèi)存在著不均勻的電子反應(yīng)，這使得灰度相同的圖像成分由于在視場中所處位置不同而顯示出不同的灰皮，這種影響必須校正才能使圖像得到準(zhǔn)確測量。陰影有三個主要的來源：圖像源的不均勻光照、穿過透鏡時光路發(fā)生變化引起的透鏡明影和顯像管本身的圖像靈敏度差異引起的掃描陰影。任何圖像分析在具體運(yùn)用中都有這些陰影存在，前二者可通過安裝精密圖像分析儀來控制，后者可通過對顯像管的質(zhì)量嚴(yán)格篩選來減少影響。陰影可貯存起來，并且在每次掃描時同步地從圖像信號中去掉。

總之，經(jīng)過以上各測量步驟后，可以用徠卡顯微鏡圖像分析儀對圖像進(jìn)行測量以取得所需的參數(shù)，如灰度、面積、長度、個數(shù)等。原始的參數(shù)可由計算機(jī)轉(zhuǎn)化成容易理解的數(shù)值，例如面積可內(nèi)某圖形所占像素數(shù)轉(zhuǎn)化為平方微米，使觀察者容易理解。

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